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氣相色譜外標法與內標法步驟

發布時間:2021/8/10      點擊次數:5132

外標校準步驟:

1對每一欲分析的物質。配制至少5個濃度水平的校準標準。加一定體積的1個或數個貯備標準至容量瓶中,用適當溶劑稀釋定容。外標中的一個濃度應當接近但是要高于方法的檢測限。其它濃度應相當于實際樣品中預計的濃度范圈或者限定在檢測器的工作范圍。
2采取欲用于實際樣品的導至氣相色譜儀的進樣技術。注射每一個校準標準(如25μl注射樣,氣提及捕集等等).將峰高或峰面積的響應值對樣品注射量列表。此結果可用于繪制每一分析物的校準曲線。對于用注射器將樣品導入氣相色譜儀的,也可用另一種方法,將響應值和注射量的比率定為校正因子(CF),可以在每一標準濃度汁算每一分析物的含量。如果校正因子的百分相對標準偏差RSD%在工作范圍內低于20%,則可以假定為通過原點的直線,校正因子的平均值可以用來代替校準曲線。
*對于多響應的農藥/(PCBs),采用所有用于定量的色譜峰的總面積。
3必須在每個工作日用注射1個或數個校準標準來檢查確定工作校準曲線或校正因子。檢查的次數取決于檢測器。如ECD檢測器在亞納克范圍工作時,由于GC柱和樣品的影響較易使檢測器響應值變化,因此需要更多次的檢查校準曲線。FID檢測器靈敏度低得多,不需多檢查校正。如果任一分析物質的響應值和預計的響應差別大于±15%,則必須對那種分析物質繪制一新的校準曲線。

  式中:Rl一*次分析的校正因子;R2一以后分析的校正因子。

內標校準步驟:
1用此方法時,分析人員必須選擇一個或數個欲分析化合物的化學性質相似的內際物質。分析人員必須進一步證明內標物質的測量不受方法或基體干擾的影響。由于這些限制,所以不可能推薦一種可用于所有樣品的內標物。
2加一定體積的一個或數個貯備溶液至容量瓶中配制至少5個濃度水平的各個欲分析物質的校準標準。對每一個校準標準加已知的恒定量的1個或數個內標物質。用適當溶劑稀釋定容。其中一個標準的濃度應接近但要大于方法的檢測限,其它濃度應相當于實際樣品的預計濃度范圍。
3用和實際樣品欲采用的相同的導入方法(如25μl注射量或氣捉及捕集法等等),注射每一個校準標準。將峰高或峰面積響應值對每一化合物或內標的濃度列表。按下式計算每一化合物的響應因子(RF):

  式中:As一待測分析物質的響應值;Ais一內標的響應值;Cis一內標的濃度(μgL);Cs一待測分  析物質的濃度(μgL)。
如果RF值在工作范圍內是恒定的(<20% RSD)。則可以假定RF位不變,RF的平均值可以用于計算。或者也可以將結果繪制響應值比率(AsAis)對RF位的校準曲線。
4必須在每個工作日測量一個或數個校準標準以檢查工作校準曲線或RF值。檢查的次數取決于檢測器。如ECD檢測器,在亞納克級工作范圍時。由于GC柱和樣品的影響較容易使響應值變化,因此需要比較多次的校準。FID檢測器靈敏度很低,要求檢查的次數則可少些。如果任一分析物質的響應值和預計的響應值的差別大于±15%,必須對該化合物繪制一新的校準曲線。
5保留時間窗。
5.1建立保留時間窗之前,先確定GC系統是在*操作條件范圍內。在整個72h過程中將所有單組分標準的混合物及多響應物質(如PCB)注射3次樣。在不到72h期間連續注射進樣會使保留時間窗太密。
5.2計算每一單組分析標準的3次保留時間的標準偏差。對于多響應物質,從圖中選擇一個主要的色譜峰,計算該峰的3次保留時間的標準偏差。所選擇的色譜峰應該完避免由于樣品中有降解和衰減而受到的損失。
5.2.1對每個標準加減3倍保留時間的標準偏差,用以限定保留時間窗,但是在色譜圖的解釋上。分析人員的經驗應該占更重要的份量。對于多響應物質(如PCBs)。分析人員應該用保留時間窗,但是首先應依靠圖形識別。
5.2.2在某個標準的標準偏差為零的那些情況下,實驗室必須換一洗脫相近的類似化合物的標準偏差建立有效的保留時間窗。
5.3實驗室必須計算每一標準在每一根GC柱上的保留時間窗。無論何時安裝一根新的GC柱時,要重新計算保留時間窗



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